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本试剂盒可从植物样本中提取线粒体膜蛋白，操作简单快捷，可在40～45min内完成操作，含有蛋白酶抑制剂，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用，该试剂盒主要用于从植物样本中提取线粒体膜蛋白，提取出来的膜蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blot、免疫组化、酶活性测定等下游实验。

• 如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
  
• 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈Vortex使样品裂解充分，然后同样离心取上清，用于后续实验。
  
• MP裂解液、蛋白酶抑制剂混合液(100×)、PMSF(100mM)置于室温溶解时，应尽量缩短溶解时间，避免有效成分失效。
  
• 裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验；如果检测一些常见的转录因子，例如NF-KB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
  
• 裂解的操作步骤，应置于冰上或4℃进行。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 配制线粒体膜蛋白提取液：取适量的MP裂解液、蛋白酶抑制剂混合液(100×)、PMSF(100mM)置于室温溶解混匀，按97∶1∶2，使蛋白酶抑制剂混合液、PMSF工作浓度为1×、1mM，即为线粒体膜蛋白提取液。4℃保存，1天有效。
  
• 取植物组织或叶片2.5g，洗净、剪碎，加入5mL预冷的线粒体膜蛋白提取液，在冰浴条件下迅速研磨或匀浆，研磨或匀浆过程亦可置于液氮中充分研磨，再加入5mL预冷的线粒体膜蛋白提取液。
  
• 将匀浆液经200目细胞筛或3层纱布过滤，4℃ 1800g离心15min，弃沉淀，留上清。
  
• 取上清液，4℃ 17000g离心20min，弃上清液，留取沉淀。
  
• 取50～150μL线粒体膜蛋白提取液悬浮沉淀，即为线粒体膜蛋白，-70℃保存备用，进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。